PGD

Preimplantační genetická diagnostika

Rozvoj asistované reprodukce a molekulárně genetických metod umožnil posunout diagnostiku genetických poruch do velmi ranných vývojových stádií embrya. Při využití preimplantační genetické diagnostiky (PGD) je možné vyšetřit již třídenní embryo. Ve spojení s umělým oplozením, kdy je většinou k dispozici více embryí, než může být přeneseno do dělohy, má tato metoda velkou výhodu – k přenosu vybrat pouze ta embrya, která jsou normální pro všechny vyšetřené parametry a tím zvýšit pravděpodobnost úspěšného těhotenství a narození zdravého dítěte. Vyšetření je provedeno ihned po odběru buňky z embrya. Doba, po kterou se embryo vyvíjí ve vnějších podmínkách, zůstává stejná jako u nevyšetřovaných embryí.

Poruchy v počtu chromozomů u embrya jsou častou příčinou spontánních potratů a narození postižených dětí. Proto patří vyšetření na poruchy počtu chromozomů k nejčastější indikaci PGD. Vyšetření se provádí metodou fluorescenční in-situ hybridizace (FISH). Tato metoda umožňuje rozpoznat přítomnost chromozomu i v nedělící se buňce. Principem je barevné označení přesně ohraničeného úseku DNA (část chromozomu) tzv. DNA sondou. Umožňuje tak určení počtu kopií jednoho chromozomu v jádře buňky. Sledované chromozomy nejsou vybrány náhodně, ale na základě znalostí o výskytu četnosti chromozomálních poruch u narozených postižených dětí a potracených plodů.

Větší výskyt embryí s numerickými chromozomálními abnormalitami je zjišťován u párů s vyšším věkem matky (nad 35 let) nebo u opakovaných neúspěšných cyklech IVF. U těchto pacientů se provádí preimplantační genetický screening (PGS), to je vyšetření embryí na počet kopií „nejproblematičtějších“ chromozomů. To jsou pohlavní chromozomy (X, Y), chromozom 21, 13 ,18, 16 a 22. Trizomie (přítomnost tří kopií namísto dvou) chromozomů 13, 18, 21 a poruchy v počtu pohlavních chromozómů vedou nejčastěji k narození živého, ale postiženého plodu (trizomie chromozomu 21 - Downův syndrom, trizomie chromozomu 18 - Edwardsův syndrom, trizomie chromozomu 13 - Pataův syndrom, XXY - Klinefelterův syndrom, X0 Turnerův syndrom) - obr. 1 a obr. 2.

Další skupinu tvoří páry s výskytem dědičné choroby vázané na pohlaví (např. hemofilie), v tomto případě je možné vybrat embryo takového pohlaví, které nemůže být postiženo. V Sanatoriu Pronatal byla metoda PGD zavedena v roce 2000 ve spolupráci s oddělením genetiky a reprodukce Výzkumného ústavu veterinárního lékařství. Od letošního roku převzala diagnostiku genetická laboratoř Sanatoria Pronatal.

(obr. 1) "Zdravá" blastomera (jádro je podbarveno šedě, barevné značky jsou signály pro vyšetřované chromozomy: X - 1 fialový signál, Y - 1 oranžový signál, 13 - 2 červené signály, 18 - 2 světle modré signály, 21 - 2 zelené signály)

(obr. 2) Blastomera z embrya, ze kterého by se vyvinul plod postižený Edwardsovým syndromem (jádro je podbarveno šedě, barevné značky jsou signály pro vyšetřované chromozomy: X - 2 fialové signály, 13 - 2 červené signály, 18 - 3 světle modré signály, 21 - 2 zelené signály).